一株酸性淀粉酶产生菌的筛选与发酵条件的优化(2)

目  录
摘要…………………………………………………………………………1
关键词………………………………………………………………………1
1 前言………………………………………………………………………1
1.1  酶的定义……………………………………………………………………  1
1.2  淀粉酶的研究………………………………………………………………  2
1.3  影响酶活力的因素……………………………………………………………4
1.3.1  pH对酶促反应速度的影响………………………………………………4
1.3.2  温度对酶促反应速度的影响…………………………………………… 4
1.3.3  酶浓度对酶促反应速度的影响………………………………………… 5
1.3.4  底物浓度对酶促反应速度的影响……………………………………… 5
1.3.5  激活剂对酶促反应速度的影响………………………………………… 5 [来源：http://Doc163.com]
1.3.6  抑制剂对酶促反应速度的影响………………………………………… 5
2  材料与方法………………………………………………………………………6
2.1  材料………………………………………………………………………… 6                           
2.1.1  菌种来源…………………………………………………………………6               [版权所有：http://DOC163.com]
2.1.2  实验仪器设备与药品……………………………………………………6
2.1.3  培养基……………………………………………………………………7
2.2  方法…………………………………………………………………………7
2.2.1  耐酸性淀粉酶产生菌的富集与筛选……………………………………7
2.2.2  耐酸性淀粉酶产生菌的复筛……………………………………………7

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(1) 三角瓶液态发酵…………………………………………………………  7
(2) 麦芽糖标准曲线的制作…………………………………………………  7
(3) DNS法测酸性淀粉酶活性…………………………………………………7
2.2.3  耐酸性淀粉酶耐酸性检测………………………………………………8
2.2.4  菌株革兰氏染色和芽孢染色…………………………………8
（1）  革兰氏染色……………………………………………………………8 [来源：http://www.doc163.com]
（2）  芽孢染色…………………………………………………………………8
2.2.5  发酵条件优化……………………………………………………………8
2.2.6  耐酸性淀粉酶聚丙烯酰胺活性凝胶电泳………………………………9             
3 结果与分析…………………………………………………………………… 10
3.1  菌种筛选…………………………………………………………………… 10 [资料来源：Doc163.com]
3.1.1  初筛时能产酸性淀粉酶菌培养皿中颜色………………………………10
3.1.2  DNS法检测酸性淀粉酶活性……………………………………………12
3.2  菌种OYC07形态学分析……………………………………………………13
3.3  耐酸性淀粉酶发酵条件的优化…………………………………………… 13
3.3.1  发酵时间与酶活力关系…………………………………………………13
3.3.2  麸皮浓度酶活力关系……………………………………………………14 [资料来源：http://www.doc163.com]
3.3.3  发酵温度酶活力关系……………………………………………………15
3.3.4  发酵转速与酶活力关系…………………………………………………15
3.3.5  发酵液pH与酶活力关系……………………………………………16
3.3.6  正交试验…………………………………………………………………17
3.4  耐酸性淀粉酶聚丙烯酰胺活性凝胶电泳…………………………………18
4结论………………………………………………………………………… 18                       [资料来源：www.doc163.com]
参考文献…………………………………………………………………………19